Virtaus-sytometripurku

Virtaus-sytometrin anatomia

Sytometri on mikroskooppi, joka kieltäytyy katsomasta kuvaa. Se ohjaa soluja yhden kerrallaan laserin tarkennuksen ohi ja laskee fotonit tapahtumaa kohden, joten jokainen valinta laitteessa on oikeastaan valinta siitä, kuinka monta fotonia yksi solu voi tuottaa ennen kuin se poistuu säteestä. Valitse osa materiaaliluettelosta ja pudota se poikkileikkaukseen; jokainen parametri sisältää siihen liittyvät katalogiosanumeroiden tiedot.

Kuinka käyttää tätä sivua
  1. 1Valitse osa materiaaliluettelosta.
  2. 2Pudota se moduuliin tai napsauta korttia.
  3. 3Lue sen tehtävä, sen parametrit ja niiden takana olevat osanumerot.

Materiaaliluettelo

Jokainen osa, yksi optinen budjetti. Vedä kortti valokuvan päälle tai napsauta sitä - sen vieressä oleva paneeli täyttyy kyseisen osan parametreilla.

Opetuskatsausvirtaus-sytometri: vasemmalla kolme kuitukytkettyä laseria, niiden yläpuolella suojaputkien ja näyte-nesteiden virtaus, keskellä virtauskenno, jossa säde, solujen virtaus ja keräysoptiikka kohtaavat, oikealla dikrooi- ja suodinhylly sen detektoreineen, ja alhaalla hankintalevy

Vedä osa tähän tai napsauta materiaaliluettelossa olevaa korttia

Opetuskatsaus, ei kokoonpanopiirros. Vasemmalla laserit, niiden yläpuolella nesteiden virtaus, keskellä virtauskenno ja sen tutkimuspiste, oikealla suodin- ja detektorihylly, alhaalla hankintalevy.

Komponenttien paikat ovat opetuskaaviota, eivät kokoonpanopiirustusta: sijoitus ja räjäytyskuva ovat suuntaa antavia. Parametriarvot ovat linkitetyn spesifikaation arvoja.

Jokainen osa parametri kerrallaan

Interaktiivisessa näkymässä näkyvät samat numerot taulukoissa voit lukea, etsiä ja lainata.

405 nm violetti laseri Virityslähde

Asettaa kuinka monta fotonia violettimerkityt solu voi lähettää. Tärkeää ei ole otsikkoteho vaan teho, joka säilyy kuidussa, pysyykö se vakiona ajon aikana ja missä linja sijaitsee suhteessa suodattimiin: 405 nm:n 2 nm leveä linja siirtyy 0,3 nm per kelvin, joten kotelon lämpötila siirtää eksitaation väriaineen absorptioalueen ulkopuolelle kauan ennen kuin mikään optiikassa liikkuu.

405 nm violetti laseri - Yksimuotoinen kuitukytkentä | CW
Keskiaallonpituus 405 nm
Lähtöteho, CW 70 mW
Tällä linjalla tarjottu teho 70 mW | 80 mW
Spektrileveys (FWHM) 2 nm tyypillinen
Aallonpituuden lämpötilakerroin 0.3 nm/K
Kuitusäikeen halkaisija 3 um
Numeerinen aukko 0.13
Liitin FC/PC, SMA905, FC/APC
Väriaineet, joille tämä linja on valittu BV421, Pacific Blue, DAPI (esimerkkejä)
Tavalliset emissioikkunat 450/50 nm, 525/50 nm (esimerkkejä)

488 nm sininen laseri Virityslähde

Asettaa fotonibudjetin jokaiselle sinisellä valolla aktivoidulle kanavalle kerralla. Koska kolme ikkunaa jakaa yhden linjan, teho jakautuu niiden kesken ja himmeimmän väriaineen asettama raja määrittää speksin: katalogin 25 mW linja riittää hyvin merkitylle paneelille, ja kanavan rajoitus on yleensä suodatin ja ilmaisimen eikä laserin.

488 nm sininen laseri - Yksimuotoinen kuitukytkentä | CW
Keskiaallonpituus 488 nm
Lähtöteho, CW 25 mW
Spektrileveys (FWHM) 2 nm tyypillinen
Aallonpituuden lämpötilakerroin 0.3 nm/K
Kuitusäikeen halkaisija 3 um
Numeerinen aukko 0.12
Liitin FC/PC, SMA905, FC/APC
Väriaineet, joille tämä linja on valittu FITC, Alexa Fluor 488, PE, PerCP (esimerkkejä)
Tavalliset emissioikkunat 530/30 nm, 585/42 nm, 695/40 nm (esimerkkejä)

638 nm punainen laseri Virityslähde

Asettaa, kuinka pitkälle kauas punaiseen paneeli voi yltää. Teknisissä tiedoissa mainitaan yleensä 640 nm linja; 638 nm on linja, jonka luettelo sisältää, ja se sijaitsee samassa absorptioalueessa, joten 640 nm:lle rakennettu suodattimien pino toimii muuttumattomana. Mitä punainen linja ei siedä, on tarpeeksi tumma ilmaisija: 660/20 ja 780/60 ikkunat ovat leveitä, ja kanavan rajoitus on ilmaisijan pimeävirta, ei excitointi.

638 nm punainen laseri - Yksimuotoinen kuitukytkentä | CW
Keskiaallonpituus 638 nm
Lähtöteho, CW 70 mW
Tällä linjalla tarjottu teho 70 mW | 100 mW
Spektrileveys (FWHM) 2 nm tyypillinen
Aallonpituuden lämpötilakerroin 0.3 nm/K
Kuitusäikeen halkaisija 4 um
Numeerinen aukko 0.13
Liitin FC/PC, SMA905, FC/APC
Väriaineet, joille tämä linja on valittu APC, Alexa Fluor 647, APC-Cy7 (esimerkkejä)
Tavalliset emissioikkunat 660/20 nm, 780/60 nm (esimerkkejä)

Kuidun toimitus Optinen polku

Asettaa mittauspisteen ja sen, ovatko kolme viivaa siellä samalla suoralla. Yhden tilan pigtailin lähtö on jo määritelty kuidulla: ytimen halkaisija ja numeerinen aukko määräävät hajonnan, ja käynnistysobjektiivi muuttaa sen solun virtauskennoon tarvittavaksi vyötäröksi. Jos kolme viivaa eivät ole samansuuntaisia muutaman mikrometrin tarkkuudella, yhden väriaineen merkitty solu saa eri kimmeltävän intensiteetin kuin toisen väriaineen merkitty solu.

Kuidun toimitus - Yksimuotoinen jatkokaapeli | yhdistin ja lähtöoptiikka
Linjat toimitettu 405 / 488 / 638 nm
Kuitutyyppi yksimuotoinen tila
Kuitusäikeen halkaisija 3 um
Numeerinen aukko 0.12
Kuidun pituus 100 cm (110 cm maks.)
Liitin FC/PC, SMA905, FC/APC
vähintään. taivutus säde >= 300 x kuidun halkaisija
Laukaisu yksi objektiivi jaettuna kolmen linjan kesken
Ko-linjarisuus tarkastuspisteessä säädetty rakentamasi laukaisukokoonpanon mukaan Suunnittelusi mukaan

Kuori- ja näytenesteet Nestetekniikka

Asettaa viipymäajan, ja viipymäaika määrittää fotonibudjetin. Solu, joka kulkee 10 µm:n pisteen läpi nopeudella 1 m/s, on säteessä 10 µs; kaksinkertaista virtausnopeus ja jokainen tapahtuma menettää puolet fotoneistaan, jotka vain laseri voi palauttaa. Tämä on kytkentä, joka ratkaisee, riittääkö 25 mW linja vai tarvitseeko suunnittelu huippuluokan.

Kuori- ja näytenesteet - Hydrodynaaminen fokusoiminen | suojakuori, näyte, jäte
Viipymäaika säteessä 10 us 10 um pisteellä 1 m/s nopeudella
Ytimen halkaisija tarkastuspisteessä säädetty suuttimen ja suojuksen näytetiheyden suhteen mukaan Suunnittelusi mukaan
Virtausnopeus säädetty tarvitsemasi tapahtumataajuuden mukaan Suunnittelusi mukaan
Näytteen ja suojuksen paine säädetty rakentamiesi nestekanavien mukaan Suunnittelusi mukaan
Jätteen käsittely määräytyy analyysin ja sijainnin mukaan Suunnittelusi mukaan

Virtaussolu Kysely

Asettaa geometrian, johon loput optiikasta rakennetaan. Kuwetin seinämän paksuus ja pintalaatu määräävät, kuinka paljon virityssäteilyä hajaantuu keräyspolulle; sen sijainti määrittää, mihin vyötärön ja objektiivin on sijoituttava; ja se on osa, jota on vaikein muuttaa myöhemmin, minkä vuoksi virtauskenno valitaan yleensä ennen sitä ympäröivää optiikkaa.

Virtaussolu - Kvartsikuvetti | yksi laserin tarkennus
Viritysviivat kohdistettuna siihen 405 / 488 / 638 nm
Kyselypiste yksi piste, kaikki kolme linjaa ko-aksiaalisia
Vyötärön halkaisija säädetty laukaisutavoitteen mukaan Suunnittelusi mukaan
Kyvetin geometria ja seinämän paksuus säädetty hankkimasi virtauskennon mukaan Suunnittelusi mukaan
Häiriösiirtyvä valon lähde, joka saavuttaa keräyspolun säädetty kyvetin ja säteenpoistimen mukaan Suunnittelusi mukaan

Keräysoptiikka Optinen polku

Määrittää, mikä väri havaitaan milläkin ilmaisimella. Kaistasuodatin kirjoitetaan keskikohta yli leveys - 530/30 päästä 515-545 nm - ja ikkuna pitää asettaa värin emissiotipulle, ei koskaan laserlinjalle. Dikrootti, joka erottaa 405 nm violetin aiheuttamasta fluoresenssista, on eri osa kuin se, joka erottaa 638 nm, minkä takia eksitaatiolinjat valitaan ennen suodatosarjan asettelua.

Keräysoptiikka - Objektiivi, dikrooiset peilit, kaistanleveysfiltterit
Keräyskulma 90 astetta säteeseen nähden
Tyypilliset kaistanpäästöikkunat 450/50, 530/30, 585/42, 695/40, 780/60 nm
Virityksen esto säädetty rakentamasi suodatinpinon mukaan Suunnittelusi mukaan
Dikroinen jakaa aallonpituudet säädetty väriainepaneelin mukaan Suunnittelusi mukaan
Pitkäpäästösuodatin tandemkanaville säädetty käyttämiesi tandemiväriaineiden mukaan Suunnittelusi mukaan

Detektorit Havainto

Vahvistus, pimeävirta ja ylimääräinen kohina määrittävät himmeimmän väriaineen, jonka paneeli pystyy kantamaan. Katalogin piipohjaiset APD:t reagoivat aallonpituuksilla 400 nm - 1100 nm, mikä kattaa koko näkyvän fluoresenssialueen; se, otetaanko yksi niistä fotomultiplaattorin tilalle tietyssä kanavassa, riippuu fotonien määrästä tapahtumaa kohden, ei siitä, sopiiko teknologia aallonpituuteen.

Detektorit - Fotomultiplikattori tai lumivyörydiodi
Vastespektri 400 - 1100 nm
Aktiivinen halkaisija 230 um
Vastekyky 80 A/W @ M=100
Pimeävirta 0.4 nA @ M=100
Optimaalinen vahvistus 100
Vastesuunta 0.5 ns
Käänteisen jännitteen hajoamispiste 100 - 200 V
Jännitetemperatuurikerroin 1.1 V/C
Kanavien määrä säädetty väriainepaneelin mukaan Suunnittelusi mukaan

Signaalin hankinta Elektroniikka

Asettaa kohinatason ja dynaamisen alueen, jotka yhdessä päättävät, onko paneelin himmin kanava todellinen signaali vai vahvistimen puhetta. Sen on myös pidettävä jokaisen detektorin esijännite: APD-kanavat toimivat 100 - 200 V:lla 1,1 V/K hajoamiskertoimella, joten esijännitesilmukka ilman lämpötilan kompensaatiota muuttaa vahvistusta pois kalibroinnista, joka asetettiin 25 °C:ssa.

Signaalin hankinta - Analoginen etupää, digitoija, ilmaisimen jännite
Viipymäaika, jonka etupään on katettava 10 us 10 um pisteellä 1 m/s nopeudella
APD jännite 100 - 200 V
APD jännitevahvistuksen kompensointi 1.1 V/C
Kanavien määrä säädetty väriainepaneelin mukaan Suunnittelusi mukaan
Näytteenottotaajuus säädetty suunnittelemasi pysähdysaika mukaan Suunnittelusi mukaan
Dynaaminen alue säädetty paneelin kirkkaimman ja himmeimmän väriaineen mukaan Suunnittelusi mukaan

Kotelointi Mekaaninen

Lämpösuunnittelu, pääasiassa. Kolme lukua määrää sen: kytkinlinjat ajautuvat 0,3 nm per kelvin, kaistanpäästöikkuna on kymmeniä nanometrejä leveä, ja APD:n purkausjännite liikkuu 1,1 V per kelvin. Kymmenen kelviniä kotelon lämpötilan nousua käyttää 3 nm 30 nm ikkunasta ja 11 V 100–200 V jännitteestä; kumpikaan ei ole kohtalokasta, mutta molemmat ovat palautettavissa vain, jos runko tekee niistä ennustettavia.

Kotelointi - Runko, optinen penkki, lämpöpolku
Lähteiden aallonpituuden muutos 0,3 nm/K kaikilla kolmella viivalla
Ikkuna kulutettu 10 K:n kotelokorotuksella 3 nm 30 nm kaistanpäästöstä
APD jännitteen hitaus 1,1 V/K APD-kanavilla
Työpöydän jäykkyys määräytyy kohdistuksen mukaan, jonka täytyy pysyä Suunnittelusi mukaan
Suojaus ja EMC säädetty etupään kohinan tason mukaan Suunnittelusi mukaan

Jokainen tämän sivun parametriarvo on vedetty luettelotietueesta, joka hahmontaa linkitetyn tuotesivun, joten nämä kaksi eivät voi olla eri mieltä.

Osat näiden parametrien takana

Jokainen alla oleva kuva luetaan samasta luettelotietueesta, joka tekee tuotesivun. Mitään tällä sivulla ei ole kirjoitettu uudelleen.

Kolme kuitua tekee suurimman osan työstä

Suodata luettelo kuitukytketyn kategorian mukaan ja kolme tällä sivulla olevaa linjaa tulevat takaisin yksimuotoisina modulaatteina: 405 nm violetin väriaineille, 488 nm FITC:lle ja PE:lle, 638 nm APC:lle ja kaukovermeille tandemväriaineille. Valitsimella ei ole vielä sytometria-sovellusta - lähetä meille paneeli käyttämistäsi väriaineista, niin työskentelemme takaisin emitointivälien kautta linjoihin ja tehoihin.

Lähetä meille väriainepaneeli, ei osanumeroa

Jokainen tämän sivun rivi on valittu emissioikkunaa vastaan. Kerro meille, mitkä väriaineet paneelissasi on tunnistettava, niin tulemme takaisin esittämällä niille vaadittavat eksitaatioaallot, niiden tarvitseman tehon ja suodattimet, joita ne edellyttävät.

Kysy insinööriltä